Investigating The Effect Of Serum Concentration On The Expression Pattern Of Pluripotency And Lineage-Specific Markers In Mouse Embryoid Bodies Using Immunofluorescence

الملخص

تتمتع الخلايا الجذعية الجنينية (ESC) بقدرة التجديد الذاتي غير المحدود في المختبر وتتمايز إلى خلايا مكونة من جميع الطبقات الجرثومية الثلاث البدائية. الطابع المتجدد ESC يجعلها مصدرا جيدا لتطبيقات زرع الخلايا وهندسة الأنسجة. عندما يتم السماح ESC بالتمايز في مزرعة معلقة دون وجود عوامل مضادة للتمايز ، ينتج عنها تطور المجاميع متعددة الخلايا ثلاثية الأبعاد المعروفة باسم الأجسام الجنينية (EBs) . وهذه تمثل نموذجًا جيدًا لدراسة التطور الجنيني المبكر. يتأثر تمايز  ESC داخل خلايا EBs بالعديد من العوامل الفيزيائية والكيميائية ، ومن هذه العوامل المصل في الوسط الغذائى الحاضن ، حيث أنه يحتوي على الهرمونات وعوامل النمو. في هذه الدراسة ، تم بحث تأثير تراكيز مختلفة للمصل على تمايز EB والفرق بين mRNA والتعبير البروتينى لعلامات النسب المحددة والاجسام الجينية للفار اليوم الرابع من خلال استخدام  صبغة المناعة. كما تم فحص الفرق في التعبير عن هذه العوامل بين ESC للفار غير المتمايزة و EBs للفار اليوم الرابع المتمايز ان التعبير البروتينى لـ Oct4 ، و Nanog ، و Bry ، وكانت خاضعة للتنظيم في EBS مطلي في مصل عالٍ ، وتشير النتائج الي تعبير Gata6 أكثر كان هذا متفقا مع مستوى تعبير mRNA والانتقال مع دليل على التنظيم الناقص للعلامات متعددة القدرات في الأديم الباطن الخارجي. بالإضافة إلى ذلك ، تم التعبير عن Oct4 بشكل إيجابي فىESC  للفأرغير المتمايزة ، والتي تم تخفيضها بعد ذلك في EBs للفأر اليوم الرابع.